UV spektrofotometar je mjerni instrument koji koristi diskontinuirane valne dužine za uzorkovanje reflektirajućih ili transmisivnih objekata. Zbog različite strukture molekula u različitim objektima, njihova sposobnost da apsorbuju svjetlost različitih valnih dužina također varira. Dakle, svaki objekat ima specifičan apsorpcioni spektar. Instrument koji može da odvoji svako monohromatsko svetlo od mešovite svetlosti koja sadrži različite talasne dužine i izmeri njen intenzitet naziva se spektrofotometar.
Šta se UV spektrofotometar može koristiti za mjerenje?
1. Odredite sadržaj supstanci u rastvoru
Izmjerite apsorpciju standardnog rastvora (rastvor sa poznatom koncentracijom) i nepoznatog rastvora (rastvor sa koncentracijom koja se meri) i uporedite ih, jer je debljina apsorpcione ćelije ista. Alternativno, prvo se može izmjeriti apsorbancija različitih koncentracija standardne otopine i nacrtati standardna kriva. Unutar odabranog raspona koncentracije, standardna kriva bi trebala biti prava linija. Zatim se može izmjeriti apsorbancija nepoznate otopine, a njena odgovarajuća koncentracija se može naći iz standardne krive.
2. Identifikacija spojeva korištenjem UV spektroskopije
Koristeći monokromatsko svjetlo različitih valnih duljina da prođe kroz otopinu određene koncentracije, izmjerite apsorbanciju svakog monokromatskog svjetla u otopini, a zatim nacrtajte krivu valne dužine apsorpcije s valnom dužinom kao horizontalnom osom i apsorbancijom kao vertikalnom osom. Ova kriva je kriva spektra apsorpcije. Različite tvari imaju svoje krivulje apsorpcionog spektra, tako da se identifikacija vrsta tvari može izvršiti korištenjem krivulja apsorpcionog spektra.