1. Koristite online filtere
Filter u liniji je poređan između autosamplera i hromatografske kolone (ili stražarske kolone). Uobičajeni in-line filteri su podijeljeni na in-line filtere od nehrambenog čelika sa zamjenjivim fritom (0,5 μm ili 0,2 μm) i peEK za raspomjenjivu mjeru. Za online filtere od različitih materijala, obično se mora odabrati sito ploča s manjom otvorom od kolone frit ploča, kako bi se učinkovito presrele čestice koje mogu blokirati hromatografsku ploču frit kolona. Nakon što se sazna da pritisak instrumenta počinje da se povećava, moguće je da se frit in-line filtera počinje začepiti i moramo ga ažurirati prije nego što postane potpuno začepljen.
In-line filteri funkcioniraju baš kao i membrane, ali ne zahtijevaju nikakvo dodatno djelo. Nakon centrifugiranja uzorka, još uvijek je moguće da mala količina čestica uđe u instrument, a reidualne čestice mogu biti presretnute in-line filterom koji se nalazi ispred hromatografskog stupca. Osim toga, prednost online filtera je u tome što je jednostavan i jednostavan za zamjenu. Generalno, potrebno je samo 5 minuta da ga zamijeni, i može se ponovo pokrenuti za upotrebu, i ne treba trošiti vrijeme na readjusing ili kalibraciju. Druga prednost je u tome što in-line filter također može filtrirati čestice generirane starenjem i suza nekih dijelova u instrumentu. Snažno se zalažem da svaki instrument tekuće faze bude opremljen in-line filterom. Čak i ako se koristi stražarska kolona, preporučujem i instaliranje in-line filtera prije stražarske kolone.
2. Koristite stupac straže
Stražarski stup je kratki hromatografski stup instaliran ispred hromatografskog stupa. Uglavnom je dugačak 1-2 cm, a pakovanje se podudara s pakiranjem korištenog stupa, a veličina pora korištenog frita nije veća od one frita koja se koristi u koloni. Stražarski stup ima dvije funkcije: (1) može blokirati čestice koje mogu blokirati kolonu; (2) jer su stražarski stup i pakiranje stupa upoređeni, sve hemijske nečistoće koje mogu nepovratno krenuti u interakciju sa pakovanjem kolone bez vrhunca, prvo će ih zarobiti stražarska kolona.
Korištenje stražarske kolone definitivno može produžiti život kolone. Međutim, prije razmatranja da li koristiti stražarski stup, preporučuje se ocjenjivanje sljedećih tačaka:
(1) Stražarska kolona nije jeftina, pa razmislite da li se troškovi kupovine stražarske kolone mogu nadoknaditi povećanim životnim važećim kolonama;
(2) Koliko je dug život stražarske kolone? Potrebno je obratiti pažnju na to kada je potrebno zamijeniti ulošak straže, kako ne bi kontaminirao hromatografski stup jer je zamjena prekasno;
(3) Kako pustiti vodu u kolonu straže? Pri isperu, stub čuvara i hromatografski stup treba posebno oprati kako bi se izbjeglo isperanje nečistoća nakupljenih u stupcu straže u hromatografski stup;
(4) Ne očekujte povećanje efikasnosti stupa zbog dodatka stražarske kolone od 1-2 cm. Iako je instalacija zaštitnog stupa slična povećanju dužine stupa, korištenjem zaštitnog stupa dodaju se i dva konektora i spajajuće cijevi, što će smanjiti efikasnost stupa instrumentnog sistema, pa bi bilo dobro da se zadrži efikasnost kolone bez zaštitnog stupa.
Bespotrebno je reći, korištenje stražarske kolone svakako može produžiti život kolona, ali se preporučuje da svaka laboratorija ocijeni potrebu za stražarske kolone u smislu ekonomije i napora. Čak i sa stražarskom kolonom, preporučio bih stavljanje in-line filtera između stražarske kolone i autosamplera, nakon svega što je zamjena in-line filtera jeftinija od zamjene stražarske kolone i povećava život i stražarske kolone i kolone.
3. Ne unosite neliječene uzorke
Sa ili bez predliječenja preporučuje se filtriranje svih uzoraka ili centrifugiranje prije injekcije. Na primjer, kada se uzorak filtrira kroz filtersku membranu kako bi se uklonile čestice i time smanjilo začepljenje frita hromatografskog stupa, veličina pora filterske membrane mora biti manja od veličine pora frita hromatografskog stupa. Općenito, hromatografski stupovi sa česticama većim od 3 μm koriste 2 μm frita, Hromatografski koloni sa česticama od 3 μm koriste frit od 0,5 μm, a kolone sa česticama manjim od 3 μm uglavnom koriste frit od 0,2 μm, tako da se opšti filteri od 0,45 μm u osnovi mogu koristiti u svim hromatografskim kolonama osim za čestice sub-2 μm; za stupove sa pod-2 μm česticama , filteri sa 0,2 μm pore se uglavnom koriste . Većina filtarskih membrana je prepakovana i mogu se direktno povezati sa špricom za filtriranje ili se koriste kao filterska ploča u 96-dobroj ploči.